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基因合成FAQ

Gene Synthesis FAQ

君跻生物基因合成服务主要优势有哪些？

1.合成速度快，下单之后72h，第四天出测序结果，全流程GS内部完成（从接收引物到发货质粒），随着引物质量的稳定，70%以上的订单可以在五个自然日内发货，引物质量提升到0.5‰，GS准时发货率可以稳定在95%以上
2. 所有质粒无菌检查检测之后发货，大抽质粒需求量100%交付
3.对于高拷贝质粒，可以免费10ug发货

全基因合成的服务流程是什么？为什么全基因合成的费用要比引物合成高？

引物合成只是全基因合成服务流程中的一个步骤，后续还需要拼接、克隆、筛选、QC验证后最终交付成品质粒，因此全基因合成的费用更高

定义的难度基因有哪些？

高GC序列：通常指GC含量＞70%的序列或连续100 bp以内GC含量＞80%的序列；
低GC序列：通常指全长GC含量＜25%的基因或连续100 bp以内GC含量＜15%的序列；
长序列基因或者载体过大（＞10 kb）导致亚克隆拼接困难；
特殊载体元件或者特殊蛋白基因（如致死基因、离子通道蛋白、基因甲基化、载体中重复序列等）；
重复片段基因：包含正向重复或者反向重复；
含有多个连续碱基的基因 (如Poly A终止信号)等复杂基因。

全基因合成组装方法有哪些？

1. Gibson组装：基于5‘核酸外切酶、DNA聚合酶及连接酶，利用DNA片段的两端同源序列（长度一般为15-40 bp），实现DNA组装；
2. Golden Gate组装：利用ⅡS型限制性酶在识别位点外部切割的特点，设计特异的突出序列，同时组装多个片段，并且酶切和连接可以同时进行；
3. SLIC：利用DNA末端特定的核酸片段相互吸引，通过连接酶将DNA片段连接在一起；
4. 根据基因的大小、复杂性还有同尾酶BioBrick、UNS等方法。

全基因合成服务对于送样有何要求？

对于客户提供的样品质粒或者菌液需求：
1. 菌液：请将过夜培养的菌液200-500ul加入灭菌甘油至终浓度为15-20%，保存于1.5 mL或2 mL的离心管中，注意封口，以免污染；
2. 质粒：需提供2-5 μg溶于无菌水/low TE缓冲液的质粒溶液或冻干质粒，注意封口，以免污染；
请在管壁上注明样品名称及抗性，提供质粒的序列图谱以及提供基因酶切位点上下游不少于50 bp的载体骨架序列，确保基因准确克隆在指定载体位置，并分析相应酶切位点在目的序列和载体中的分布情况。

全基因合成最终交付和发货文件有哪些？

1. 全基因合成交付成品包括：
1）冻干质粒DNA一管（约2-4 μg）；
2）对应质粒的甘油菌一管（200-500ul）；
3）质检报告单COA一份；
4）发货单一份；

2. 发货文件（电子版）包括标准序列、测序结果、测序图谱，质粒结构图、质粒全长DNA文件以及样品质检报告（COA）；
项目完成后，这些文件将以邮件形式打包发送至您的邮箱。

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