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Sanger测序服务

Sanger sequencing service

在生命科学领域,君跻生物以其卓越的实力为众多专业机构的研究人员提供着顶尖的 Sanger 测序服务。涵盖了学术机构,制药企业,GLP 规相关企业,专注于生物领域探索的生物企业以及承担重要科研任务的政府机构。
Sanger 测序作为当前测序精度最高的测序手段,在科研实践中有着重要的应用场景。它主要被用于常规克隆检测领域,为克隆实验提供精准的数据支持;在单基因检测方面发挥着关键作用,助力科学家深入探究基因的奥秘;还在小通量筛选等少量个体水平研究中展现出独特价值。因其高度的准确性和可靠性,Sanger 测序被誉为“测序金标准”。
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服务类型 样本类型 交付周期 送样标准 交付标准
Sanger测序 质粒、PCR产物 1-2个工作日 浓度> 50 ng/μl,体积大于5µl/反应,大片段质粒(> 10kb)请在测序单上注明长度  
已纯化PCR产物 1-2个工作日 浓度>10ng/μl,体积大于5µl/反应,电泳检测条带单一,且大小正确
未纯化PCR产物 1-2个工作日 条带不单一的PCR产物:浓度需> 10ng/µl,体积> 20µl 条带单一的PCR产物:浓度需> 10ng/µl,体积> 5µl/个反应 若片段大小< 200bp,建议克隆后测序;送样前取2μl 样品做电泳检测,确保目的条带清晰可见
菌液 1-2个工作日 请将50μl (不少于30µl)过夜培养的新鲜菌液或甘油菌,装入1.5 ml 离心管中,  清晰标注   样品编号
平板菌落 1-2个工作日 平板菌落: 请将待测的菌落圈选标注并编号,并使用缓冲垫以防运输过程中出现破损
菌种鉴定 基因组DNA <24个样品,7-9个工作日 浓度≥50 ng/μl, 总体积≥10μl;且无明显降解 PCR产物电泳图、PCR产物测序结果 blast结果、实验报告
SNP检测与突变分析 基因组DNA 数量≤15个;5工作日;每增加15个;增加3个工作日  样本干重≥0.5g,培养细胞个数≥5*106   PCR扩增+测序
核酸样本 扩增数≤96个; 4-5个工作日; 每增加96个, 增加3个工作日 体积≥10µl;浓度≥20ng/µl;无明显降解
微卫星(SSR/STR)分析 荧光PCR产物 跑板数≤5板,5个工作日 体积≥5µl; 浓度≥20ng/µl(每个电泳反应) 跑板结果 (.fsa文件, PDF版) 结果分析文件 (Excel表格)
基因组DNA 扩增数≤5板,7-10个工作日 体积≥10µl; 浓度≥20ng/µl
单克隆抗体测序 基因组DNA 重链和轻链可变区测序: 24个样本之内7个工作日 新鲜收集的杂交瘤细胞沉淀: 细胞数5×106个以上 测序结果(.ab1&.seq) 构建好的质粒样品(可选) 抗体测序报告
核酸样本 重链和轻链可变区+恒定区测序: 24个样本之内10个工作日 Total RNA:浓度不低于100 ng /μl,体积10 μl以上, RNA总量2μg及以上,条带清晰无明显降解,RIN值7以上
细胞系分析 细胞STR鉴定 5-7个工作日 基因组DNA:浓度≥50 ng/μL,总体积≥10μL;且无明显降解 细胞悬液或沉淀:细胞数≥ 106 测序结果(.ab1&.seq)
支原体检测 3-5个工作日 细胞上清:培养48h-72h, 且细胞密度至少80% ,体积≥1ml
细胞鉴定 5-7个工作日 提供基因组DNA、细胞悬液或沉淀用于细胞STR鉴定 提供细胞上清用于支原体检测
TA克隆测序 <800bp 5个工作日 样品名称、片段大小、是否纯化、产物是否带有A尾 测序结果(.ab1&.seq)
800-2000bp 7个工作日
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服务流程

模板制备

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定量稀释

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测序加样

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上机检测

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结果自动判读

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Question & Answer

为什么测序填写了测通3k而测序结果只有1k左右?

正常一个测序结果保证约800bp左右准确度,长片段测通需要多个反应测序结果拼接才能测通,如订单测序要求填写了测通我们会根据已出测序结果设计引物延伸至测通并在测通后向您发送拼接结果,如测通过程中有问题也会及时反馈给您。

为什么填写了合成引物信息并告知反向测序而测序结果是正向测序结果?

测序是根据老师提供的引物序列进行合成并测序,测序无法控制引物方向均是根据引物方向延伸测序,如合成引物需反向测序需要老师自行进行反向互补,或发送订单时告知序列需要进行反向互补我们为您安排反向互补后再合成测序。

为什么PCR样品一定要填写片段长度?

因为PCR样品测序我们需要鉴定条带大小是否符合您的预期,如不符合很有可能扩增出来的条带不是您的目的条带而导致测序不符合预期,并且鉴定时如存在多带的情况我们也可根据您提供的片段长度切胶回收您要求的条带进行测序。

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